ساخت و بررسی اثر نانوپارتیکلهای پلی اتیلن گلیکول-پلی آمیدوآمین (pamam) هدفمندشده با نانوبادی علیه tag72 و حامل سازه کدکننده پروتئین کشنده t-bid

thesis
abstract

ژن درمانی یک راهکار انقلابی جدید در درمان سرطان است. ساخت حامل ژنی کارآمد و ایمن به سبب تأثیر در موفقیت انتقال ژن بسیار حائز اهمیت است. تاکنون حاملین ژنی متعددی، که به طور کلی در دو دسته حاملین ژنی ویروسی و غیرویروسی قرار میگرند، ساخته و بررسی شده اند. اگرچه حاملین ژنی ویروسی، هم در انتقال و هم تضمین بیان ژن انتقالی بسیار کارآمد هستند ولی مشکلات مربوط به ایمنی زیستی و هزینه های بالا برای شرایط خاص تولید آنها محققان را برآن داشته که به سیستمهای غیرویروسی توجه بیشتری کنند. در میان پلیمرهای کاتیونی به عنوان حاملین ژنی غیروویروسی، دندریمرهای pamam کلاس جدیدی از نانو پلیمرها با ساختار سه بعدی پرانشعاب و بسیار یکنواختی هستند که قابلیت زیادی در بسته بندی مولکولهای دیگر در فضای درونی اشان را دارند. آنها با داشتن گروههای آمین باردار مثبت در سطحشان میتوانند با مولکولهای دارای بارمنفی dna واکنش داده و آنها را در درون خود فشرده ساخته و ساختارهایی به نام پلی پلکس را ایجاد کنند که به عنوان ابزارهای زیست سازگار و کارآمد انتقال dna به کار میروند. با تعدیل بارهای مثبت سطحی این دندریمر با افزودن زنجیرهای peg به سطح آن و هدفمند سازی این حامل با افزودن مولکولهای هدف گیرنده سلول، حاملین ژنی ساخته شده است که هم کارایی بالاتری در انتقال ژن هدف به سلول و هم سمیت سلولی کمتری را هم در محیط آزمایشگاه و هم بدن موجود زنده نشان داده است. مزایای کاربرد نانوبادی (آنتی بادی تک دومینی شتری) در هدفگیری آنتی ژنهای سطحی سلولها توجه زیادی را به کاربرد عملی این مولکولها به همراه داشته است. در این تحقیق نانو بادی علیه tag72 (آنتی ژن توموری بیان شونده در سطح سلولهای تومور کولون) پس از تولید، تخلیص و تعیین خصوصیات، به واسطه زنجیره های peg به نانوذرات pamam متصل شد وبه این ترتیب نانوحاملهایی برای انتقال سازه درمانی )کد کننده ژن کشنده t-bid تحت هدایت رونویسی پروموتر pmuc1 وعناصر افزاینده hre/ere) ساخته و بررسی شد. نتایج تعیین میزان مرگ و میر سلولی و نیز real time pcr کارآیی انتقال و بیان ژن با این نانوحامل به سلولهای سرطانی را تأیید می کند.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

ساخت نانوحامل دندریمری پلی آمیدوآمین-پلی اتیلن گلیکول هدف گیرنده tag۷۲ برای انتقال ژن t-bid به سلول‏های توموری کولورکتال

هدف: هدف از این تحقیق ساخت و بررسی اثر نانوحامل‏های پلی آمیدوآمین- پلی اتیلن گلیکول هدفمند شده با نانوبادی علیه tag72 برای انتقال سازه کد کننده ژن t-bid به سلول‏های آدنوکارسینومای کولون انسانی است. مواد و روش‏ها: ساب‏کلونینگ ژن نانوبادی در ناقل بیانی psj برای تولید انبوه پروتئین نانوبادی انجام و سپس نانوبادی با کاربرد ستون نیکل جداسازی شد. فرآیند جداسازی با sds-page و وسترن بلاتینگ تأیید شد. اف...

full text

انتقال سازه ژن درمانی توسط نانوذرات پلی پلکسی (نوع پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده) به سلول های سرطانی روده بزرگ

مقدمه و هدف: هدف از این تحقیق، تهیه نانوذرات پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده بانانوبادی ضد tag-72 برای انتقال سازه کدکننده ژن کشنده t-bid به سلول­های سرطان روده بزرگ (کولون) انسانی است.   مواد و روش ها: ابتدا نانوبادی نوترکیب تخلیص­شده با sds-page، وسترن بلاتینگ و الایزا تأیید­شد. پلی اتیلن گلیکول روی نانوذرات پلی اتیلن ایمین (pei) سوار شد و درنهایت با اتصال کووالان نانوبادی بر سطح نانوذرات، ناقل پل...

full text

انتقال سازه ژن درمانی توسط نانوذرات پلی پلکسی (نوع پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده) به سلول‌های سرطانی روده بزرگ

 Background and Objectives: The aim of this study was preparation of polyethyleneimine (PEI) nanoparticles targeted with anti-TAG72 nanobody for delivery of t-Bid gene construct into the human colonic adenocarcinoma cells. Materials and Methods: First of all, purified recombinant nanobody was verified by SDS-PAGE, western blotting and ELISA. Targeted polyplexes were constructed by reacting ...

full text

سنتز و شناسایی هسته- پوسته با هسته‌ی سوپرپارامغناطیس مگنتیت و پوسته درختسان پلی (آمیدوآمین) PAMAM

در این بررسی ساختار هسته و پوسته با هسته شامل نانو ذرات سوپرپارامغناطیس اکسید آهن و پوسته پلی (امیدوآمین) سنتز شد. نانو ذرات مگنتیت به روش هم رسوبی از محلول حاوی یون‌های آهن و در حضور آمونیم هیدروکسید تهیه شد؛ سپس عامل‌دار کردن سطح ذرات به کمک (3-آمینو پروپیل) تری اتوکسی سیلان انجام و در نهایت درخت‌سان پلی (آمیدوآمین) روی سطح ذرات عامل‌دار شده تا نسل 3/5 رشد داده شد. نمونه‌ها با پراش ‌سنجی پرتو...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023